技術概述
Mission Bio Tapestri平台可以對數千個細胞進行標靶DNA定序。它可以在單細胞層級檢測單核苷酸變異（SNV）、插入缺失、拷貝數變異（CNV）等。.
Mission Bio 提供一系列預先設計的基因檢測組合，涵蓋血液系統惡性腫瘤和實體腫瘤中最常見的相關基因。為了提供更大的靈活性，使用者還可以根據現有設計或從零開始創建客製化的基因檢測組合，適用於人類、小鼠或其他基因組。.
Tapestri儀器採用兩步驟微流控工作流程。首先，它封裝單一細胞並進行細胞條碼標記。接下來，帶有條碼的細胞將進行靶向多重PCR，並進一步處理以產生與Illumina相容的文庫，用於下一代定序。.
我們的核心伺服器目前託管著 Tapestri 儀器。如有任何疑問，請隨時與我們聯繫。.
服務費和訂購
單細胞標靶DNA定序
- 對每個樣本進行 5,000 至 10,000 個細胞的標靶 DNA 定序
- 可選擇預設目標面板或客製化面板
服務價格
價格受以下因素影響：
- 目標面板（預設或自訂）
- 標靶細胞數量（影響定序成本）
- 生物資訊分析的需求
- 附屬機構（香港大學、本地學者、海外學者等）
核心實驗室提供 Tapestri 封裝技術，可將細胞懸浮液中的單一細胞封裝起來，隨後進行文庫建構和 Illumina 定序。請聯絡郭欣博士（mbsinglecell.cpos@hku.hk / 2831-5483) 用於專案討論。.
服務訂購
請參考 樣品製備和提交 樣品要求部分。.
請透過以下方式提交服務請求 iLab.
技術細節
單細胞封裝
該系統能夠從單一細胞懸浮液中捕獲每個樣本 5,000 至 10,000 個細胞。.
使用者需提交每微升含 3,000 – 4,000 個細胞的細胞懸浮液，細胞大小為 30 μm 或更小，且具有良好的活力（80% 或以上）。.
在 Tapestri 儀器中，首先將細胞分離、裂解，並用蛋白酶處理以去除 DNA 結合蛋白，釋放 DNA。下一步，將裂解的細胞與條碼磁珠和試劑混合物混合，在液滴中生成帶有條碼的細胞。然後，使用多重 PCR 對目標區域進行擴增。之後，破壞液滴以釋放帶有條碼的 DNA，並添加 Illumina 接頭進行文庫擴增。純化的最終文庫即可用於定序。含有相同細胞條碼序列的文庫片段可以相互關聯。.
來源：Mission Bio
圖書館準備
該服務將包括單細胞封裝後的文庫製備。.
定序運行
產生的文庫與Illumina定序儀相容。為了讀取一端的插入序列和另一端的條碼，需要進行雙端定序。.
供應商的規格建議平均覆蓋率為 60 – 80 倍。所需的總讀取次數（以百萬計）按以下公式計算：
預期細胞數 x 擴增子數 x 建議覆蓋度
工作流程
樣品製備和提交
單細胞DNA定序所需的細胞類型
對於每個樣本，使用者需要提交一份細胞懸浮液。
– 濃度為每微升 3,000 – 4,000 個細胞
尺寸為 30 微米或更小
– 分離良好，無團塊或雙聯體
– 具備良好的生存能力（>80% 可存活）
– 重懸於不含鈣的 1x DPBS 中2+/Mg2+
樣品提交
請提前聯絡我們的同事（透過所示的電話/電子郵件）。 在此在將樣本運送到岩芯之前。.
樣品提交日期和詳情確認後，請透過以下方式提交服務請求： iLab.
請提交 單細胞（Mission Bio）樣本提交表 作為附件 iLab.
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郭欣醫生
程莉蓮女士
